目前所见到的石油发酵柠檬酸的优良菌种多用解脂假丝酵母,如PC711、B74和8—2菌种。据报道,曲霉、青霉及细菌也有利用石油原料为碳源产生柠檬酸的能力,但产酸水平不如解脂假丝酵母。
(一)解脂假丝酵母的形态特征
菌落和某些细菌的菌落相似,但菌落比纽菌的大而且厚,多为不透明。在麦芽汁斜面上菌落表面光滑、湿润、粘稠、大部分是乳白色。酵母是单细胞并具有典型的细胞结构,在葡萄糖一酵母汁一蛋白胨液体培养基中培养,25℃三天,细胞卵形到长形,卵形细胞3.–,5×5一ll微米,长细胞可长达20微米,有菌醭产生。在加盖片的玉米粉琼脂培养甚上培养时。可见假菌丝和具有隔膜的真菌丝,在真假菌丝的顶端或中间可见单个或成双的芽生孢子,有时芽生孢子轮生,有时呈菌丝假丝酵母型(图l一2)
但主要是以单细胞生活为主,长到一定程度大小就在一端长出突起,成为新的个体,最后与母体分开,这种繁殖方式称为芽殖。.酵母细胞比细菌大得多,在显微镜下很容易看到。‘二,肝月i假三三吁丐叨互牲1_丁但、
解脂假丝酵母一般是从油井、炼油厂、动植物油厂等被油脂污染的环境中分离筛选出来的,但是在果园土壤和腐烂水果中也含有不少能利用正烷烃的各种菌种,如当前我国以正烷烃为原料生产柠檬酸所采用的8-2菌种就是从果园的土壤中分离筛选出来的。它不能发酵任何糖,少数菌 种能同糖类,但是分解脂肪和蛋白质的能力很强,它能利用正烷烃来生产发酵产品,也是石油发酵制取蛋白质的较优良菌种。
利用解脂假丝酵母从液体石蜡中制取柠檬酸时,要求通气量大,发酵4~5天,柠檬酸可达150%的良好转化率。这是因为液体石蜡为碳氢化合物,其生成物为碳水化合物的柠檬酸,因此在发酵时予分子中结合了大量的氧原予。